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Qiagen 食品基因組DNA提取試劑盒
Qiagen 食品基因組DNA提取試劑盒
mericon Sample Preparation Kits適用于從多種初始材料中提純高品質核酸,如經富集的培養基(mericon DNA Bacteria和 Bacteria Plus Kits)及多種食物原材料與成品(DNeasy mericon Food Kit)等。這些復雜食物樣本的純化產物中所含PCR抑制劑的水平達到最低。純化獲得的DNA適用于各種下游應用,如應用mericon PCR Assays Kits進行real-time PCR成分鑒定、病原體檢測;或GMO DNA定量檢測。
性能 DNeasy mericon Food Kit 生產過程中,食物容易受到熱、高壓和pH值變化的影響,這些會導致DNA降解和片段化。DNeasy mericon Food Kit中的優化試劑專為回收短的DNA片段(100 bp)而設計,確保高度片段化的DNA可被有效分離,并在PCR反應中進行擴增。憑借這些優勢,DNeasy mericon Food Kit是*個可廣泛應用于從強抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中純化核酸的試劑盒,結果可靠,而且可得到純化效果。 mericon DNA Bacteria和DNA Bacteria Plus Kits 熱裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit,機械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,兩種試劑盒從革蘭氏陰性細菌中提取DNA的效率相同。但是,如果從革蘭氏陽性細菌中提取DNA,機械裂解更加有效。 原理 DNeasy mericon Food Kit 該試劑盒采用改良的CTAB純化細胞內核酸。CTAB是非離子去污劑,廣泛用于從多種類型的組織樣本中高效提純細胞內核酸。與鹽濃度相關,CTAB可能與細胞內核酸結合(低鹽濃度);也可與細胞內的抑制劑結合,如多糖、蛋白質和植物代謝產物(高鹽濃度,如在Food Lysis Buffer中)。 這種提純方法的步驟少于傳統CTAB 操作方法,應用DNeasy mericon Food Kit可在2.5個小時內可處理多達30個樣本見 經優化的方案,采用CTAB和蛋白酶K初步消化緊密組織,然后同時沉淀蛋白質和其他細胞內和來自于食品本身的抑制劑。 離心后抑制劑沉淀下來,而提純的DNA保留在溶液中。然后進行抽提,所有剩余的、未沉淀CTAB結合蛋白、CTAB結合雜質或 CTAB 結合多糖都將與其他脂溶性抑制劑一起被抽提入lv仿層。水層中含有DNA和極少的抑制劑,將進一步處理。在水相中加入結合緩沖液(調節結合條件),將其上樣到QIAquick Spin Column。純化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit 到目前為止,檢測食品病原體的主要方法是通過培養基和/或ELISA分析法。分子檢測方法,尤其是real-time PCR,經常作為這些常用方法的補充。 熱裂解使用mericon DNA Bacteria Kit,適用于多數易于裂解的革蘭氏陰性細菌(如沙門氏菌Salmonella spp.、彎曲桿菌Campylobacter spp. 和阪崎氏腸桿菌Cronobacter spp.)。機械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,適用于革蘭氏陽性細菌,如單增李斯特菌Listeria spp.。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit中的化學試劑可提高裂解效率,穩定提純的DNA,并去除可能干擾下游應用的抑制劑。 操作流程 DNeasy mericon Food Kit 使用簡單的操作方法,從勻質的食物樣本中提純DNA,獲得的純DNA適用于各種下游應用,如real-time PCR成份分析或GMO檢測。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit 使用機械裂解(鋼珠)和熱裂解(煮)的操作方法,從病原體富集的培養基中提純細菌DNA。兩種操作方法都需轉移細菌 DNA懸浮液,以適用于real-time PCR病原體檢測。 應用 應用DNeasy mericon Food Kit從食物原材料或成品中純化的DNA適用于各種下游應用,如成份鑒定。 mericon Bacteria和Bacteria Plus Kits用于從經過增菌富集培養基中純化細菌DNA。
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